1 目的

      本试验研究在保育料中添加不同水平的尊时凯龙人生就博舒对断奶仔猪生产性能
、免疫机能和肠道菌群的影响。

2 材料和方法

2.1 试验设计

      采用单因子试验设计，选择28日龄体重（8.68±0.15）kg长大二元杂交断奶仔猪225头，设5处理，分为对照组
、试验1组、试验2组、试验3组和试验4组，每个处理5个重复
，每个重复9头，每1栏
为1个重复。研究尊时凯龙人生就博舒替代抗生素对断奶仔猪生产性能的影响。正式试验期从2018年5月29日-2018年6月25日，共28天
，试验期从5月23日-5月28日预饲了6天
，6月27日对25头试验猪进行屠宰取样，
具体试验设计见表1。

2.2 试验动物的选择与饲养管理

      试验地点是在河北汉唐牧业有限公司，选择225头35日龄、体重（8.68±0.15）kg长大二元杂交断奶仔猪，按“体重、胎次
、日龄、性别”一致的原则随机分成5组，每组5个重复
，每个重复9头猪，
每1栏为1个重复
。试验设对照组、试验1组
、试验2组、试验3组和试验4组，试验期内各组猪分别采食相应日粮，试验期30天。

      试验猪采用圈养的方式

，自由采食，自由饮水，室内温度控制在20-25℃，湿度80%-85%；每天定时饲喂(8:00、12:00、16:00和20:00)
，每次饲喂以饲槽中略有余料为宜；其它饲养管理按照猪场常
规进行。

2.3 试验日粮

      参照NRC1998乳猪（7-15kg）的营养需要进行配制，试验饲粮为粉料

，尊时凯龙人生就博舒（通用型）由北京尊时凯龙人生就博生物科技有限公司提供。

2.4 测定指标

2.4.1 生产性能

      平均日增重（ADG）：分别于试验第1日龄和第28天早晨空腹称重
，计算各生长阶段的ADG；

      平均日采食量（ADFI）：每天以重复为单位记录日采食量
，然后于第14天和第28天以重复为单位计算耗料量，并计算每个重复的ADFI
；

      料重比（F/G）：根据增重和采食量计算F/G。

2.4.2 仔猪腹泻频率和腹泻指数的评定

      每天早上9:00和下午3:00以重复为单位观察记录每头猪腹泻的情况，观察粪便性状，以最高分作为当天的腹泻指数，腹泻频率=腹泻次数/(猪总头×2)×100%
，腹泻指数=腹泻评定总分数/（猪总头×3
×2）×100%。

2.4.3 仔猪皮毛指数

      在试验1天、第14天和第28天分别对乳猪的外观进行评分。皮毛得分=皮肤红润程度+毛色亮度+毛顺程度，具体评定方法见表3。

2.4.4 死亡率、成活率

      试验期间每天记录死亡猪体重，并记录每栏猪数量。

      死亡率（%）=死亡猪/总猪头数×100
；

      成活率（%）=100%-死亡率
。

2.4.5免疫机能测定

（1）免疫器官发育指数（胸腺、脾脏、淋巴结）:免疫器官发育指数=（免疫器官重量/猪体重）×100%；

（2）血液生理生化指标：总蛋白
、白蛋白
、C3
、C4
、IgA、IgG和IgM
、IL-2
、IL-4、干扰素-γ（IFN-γ）和肿瘤坏死因子-α（TNF-α）；

（3）免疫器官中CD4+、CD8+细胞检测
：Elisa试剂盒检测
。

2.4.6肠道形态结构测定

取十二指肠
、空肠
、回肠肠断进行固定，将固定的样品经冲洗
、脱水、透明
、浸蜡、包埋等处理后切片，进行苏木精－伊红染色
，显微照相，测量绒毛长度及隐窝深度，计算绒毛长度与隐窝深度的
比值，并计算绒毛高度与隐窝深度的比值（VH/CD
，VCR），各指标取平均数作为测定数据。

2.4.7常规营养成分及消化率测定

采用内源指示剂（4N盐酸不溶灰分）方法测定能量、粗蛋白
、粗脂肪、粗纤维、钙的表观消化吸收率。表观消化率计算采用内源指示剂法，计算公式如下
：

某养分消化率（%）=100-100*（b*c）/（a*d）。其中：

a：饲料中某养分含量
； b：粪样中某养分含量；

c：饲料中酸不溶灰分含量；d：粪样中酸不溶灰分含量。

2.5 统计分析

      结果用平均数±标准差表示
，数据统计分析采用SPSS17.0统计软件进行单因素方差分析（One-way ANOVA），采用Duncan’S检验进行多重比较
。

3 结果

      将各处理组断奶仔猪肠道（空肠）微生物样品进行测序，并统计各样本的α多样性指数后得到各样本 OTU 数目分别为276（对照组）、262（试验Ⅰ组）

、266（试验Ⅱ组）、302（试验Ⅲ组）

、289（试验Ⅳ组）
。Chao1 指数、ACE 指数和Shannon指数 、Simpson 指数表示微生物群落结构的变化状况。其中，Chao1 指数和ACE 指数越高，表明群落丰富度越高，Shannon指数越高
，表明群落物种的多样性越高
。

      由上表所示
，与对照组和试验Ⅳ组相比，试验Ⅲ组中ACE 指数增加，且显著高于试验Ⅰ组和试验Ⅱ组；Chao1指数高于对照组、试验Ⅰ和Ⅱ组，结果表明
，断奶仔猪日粮中添加500g/T的尊时凯龙人生就博舒能够增加空肠微生物菌群的丰富度
。与对照组和其他处理组相比
，试验Ⅲ组中Shannon指数均高于对照组和其他处理组
，结果表明，断奶仔猪日粮中添加500g/T的尊时凯龙人生就博舒能够增加空肠微生物菌群的多样性
。

      综上，我们发现
，日粮中添加500g/T尊时凯龙人生就博舒能够提高断奶仔猪空肠微生物菌群的丰富度和多样性，从而影响肠道微生物菌群的组成。

（河北农业大学）